极细链格孢菌蛋白激发子PeaTl在酵母双杂交系统中转录激活活性的检测

2000年笔者从植物病原真菌中提取获得一类新型蛋白激发子,它能提高植物自身免疫力,促进植物生长,提高作物产量和产品品质。并在研究该类蛋白的过程中,从极细链格孢菌中分离纯化到1种能诱导植物产生系统抗性、促进植物生长的蛋白,并进一步克隆了编码该蛋白的基因peaTl（Genbank登录号CH445335）。为进一步阐明PeaTl的分子作用机理,拟采用酵母双杂交技术,     

玉米根部酵母双杂交cDNA文库的构建及评价

从玉米各生长时期的根部中提取总RNA后,再利用磁珠法从中分离纯化出mRNA,然后以mRNA为模板,反转录合成cDNA第一链,再在DNA聚合酶作用下,通过长距离PCR,扩增双链cDNA(ds cDNA).利用SMART技术,通过同源重组的方法,在酵母菌株AH109中构建了玉米根部全长cDNA文库.经检测,文库的转化率为1.76×107转化子/3μgpGADT7-Rec,文库滴度为1.17×106pfu/mL,重组率为95%.     

酵母培养物添加剂固态发酵培养基的研究

[目的]为研制一种新型奶牛饲料添加剂提供一定的参考。[方法]用一定比例的不同碳氮源配制成不同碳氮比的固态发酵培养基,以活化好的福邦饲用高活性干酵母稀释液为试材,通过发酵培养和测定酵母细胞数确定其最适碳、氮源及碳氮比。[结果]在6种不同碳氮比的固态发酵培养基中,以秸秆为碳源的发酵培养基中的酵母细胞数普遍高于以玉米淀粉为碳源的。以秸秆为碳源,花生粕为氮源,碳氮比为1∶1时,发酵培养基的每克干物质中含酵母细胞1.283×109个。秸秆、玉米淀粉(2∶1)混合作碳源时,固态发酵培养基的每克干物质中含酵母细胞1.315×109个。[结论]福邦饲用高活性干酵母固态发酵的最适碳源为秸秆、玉米淀粉(2∶1)的混合物,最适氮源为花生粕,最佳碳氮比为1∶1。     

蟠桃根腐病拮抗酵母菌的筛选与鉴定

[目的]筛选能有效防治蟠桃根腐病的生防菌株。[方法]采用离体和活体法从果皮、叶子及根际土壤中进行拮抗酵母菌的初筛和复筛,对筛选出的蟠桃根腐病拮抗菌L8进行形态学观察和生理生化鉴定。[结果]从叶子中分离获得的L8对蟠桃根腐病有较强的拮抗作用,在离体条件下抑菌圈直径可达到17.2 mm,在活体条件下蟠桃果实伤口腐烂率仅为11.11%。形态学观察、生理生化试验发现L8与德巴利酵母属酵母的形态学特征和生理生化性状相似,初步认为蟠桃根腐病拮抗菌L8为德巴利酵母属酵母。[结论]蟠桃根腐病拮抗菌L8可作为有价值的拮抗菌进行下一步试验。     

耐高温耐高糖酵母的筛选与驯化

从南疆水果表皮上筛选到54株耐高温酵母菌,通过富集培养、高温高糖驯化与筛选,得到3株优良菌株,在45℃高温、20%糖度条件下,其发酵性能均能达到常温(28℃)下酿酒酵母的发酵水平。     

朊蛋白（prp23—231）酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测

PCR扩增小鼠朊蛋白（prp23-231）基因,克隆入诱饵载体psos,将重组质粒与对照质粒共转化酵母菌cdc25H,成功地构建了小鼠朊蛋白（prp23-231）酵母双杂交诱饵载体pSos-prp23～231,并证实该段基因表达的蛋白对酵母菌cdc25H既无毒性,也没有自激活作用。     

双酶法在水产品水解动物蛋白制作工艺中的应用研究

本文研究了以价廉的相手蟹，悲翠贻贝，马氏珍珠贝和青鳞鱼为原料，采用双酶法水解它们的蛋白质，经减压浓缩或喷雾干燥制作水产ＨＡＰ的工艺。结果表明：（１）四种水产原料的蛋白质水争度分别为４３．４％，８２．０％，８２．６％和９３．６％；（２）水解液的脱臭除腥方法以酵母较好，脱苦以风味酶效果最佳。水产ＨＡＰ使用方便，价廉物美，具有独特的海鲜风味和特殊的营养保健功能，是一种营养保健型的食品添加剂。     

陆地棉GhRab7基因鉴定及酵母中盐胁迫响应分析

Rab参与细胞内囊泡运输的调节,是小G蛋白家族里成员数最多的一类亚家族蛋白,拟南芥、哺乳动物和酵母Rab蛋白功能已经研究的比较清楚,但棉花中Rab蛋白的功能还没有详细的报道。本试验从陆地棉TM-1数据库中检索到24个 Rab7基因,基于这些基因的染色体分布、编码氨基酸个数及分子质量大小,鉴定出19个潜在 GhRab7基因。随后,根据系统进化和序列保守性分析克隆一个 GhRab7基因,该基因编码一个207个氨基酸,分子质量为23.2 ku的Rab类小G蛋白。对其进行高盐条件下异源表达酵母生长抗性试验的结果显示,异源表达 GhRab7的酵母表现出盐胁迫敏感的特征。这些结果说明 GhRab7在棉花应对外界盐胁迫响应时可能发挥重要作用。